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磷酸二酯酶（PDEs）通过水解第二信使环磷酸腺苷（cAMP）和环磷酸鸟苷（cGMP），在其信号的动态调节中发挥重要作用。PDE超家族由11个家族组成，其中PDE4、7和8是cAMP特异性水解酶，因此对cAMP的正负反应具有调节作用。PDE5在多种组织中表达，如肺、脑、肾、心肌细胞、血小板和阴茎海绵体。它通过磷酸化被激活，并通过亚硝基化被靶向降解。PDE5在血管张力、视觉、肾和肠道功能、蠕动、细胞生长与凋亡、癌症等方面都发挥着作用。其功能使其成为药物干预的主要候选靶点。抑制剂（主要是催化结构域的竞争性抑制剂）的研发使得西地那非、他达拉非、伐地那非和阿伐那非得以商业化，用于治疗勃起功能障碍、肺动脉高压和下尿路症状（LUTS）。PDE5抑制剂也显示出作为癌症治疗药物的潜力，在结直肠癌（CRC）患者术后使用PDE5抑制剂时，转移风险有所降低。继续深入了解PDE5的作用并开发更新的特异性治疗工具，将为PDE5相关疾病开辟新的治疗途径。
PDE5A1（小鼠）检测试剂盒是一种荧光偏振（FP）均相96孔检测试剂盒，专为筛选和分析小鼠PDE5A1（磷酸二酯酶5A1）抑制剂而设计。该检测利用了特定的荧光磷酸盐结合纳米颗粒。该试剂盒包含足够的纯化重组小鼠PDE5A1、荧光探针、PDE检测缓冲液、结合剂和稀释剂，可进行100次反应。
该测定采用荧光素标记的环磷酸腺苷（用于PDE5A1（小鼠）的cGMP-FAM），其中磷酸基团结合在环核苷酸内。这是一种非常小的分子，旋转速度快（荧光偏振值低）。PDE5A1催化环核苷酸中磷酸二酯键的水解，释放出磷酸基团。在第二步中，游离的磷酸基团被特定的磷酸结合纳米珠（结合剂）识别，形成一个大型复合物，其运动受到限制（荧光偏振值高）。荧光偏振值与小鼠PDE5A1的活性成正比。
Assay Kit Format
Fluorescence Polarization
Species
Mouse
Supplied As
The kit contains enough purified recombinant mouse PDE5A1, fluorescent probe, PDE assay buffer, Binding Agent, and diluent for 100 reactions.
Materials Required But Not Supplied
- Adjustable micropipettor and sterile tips
- Rotating or rocker platform
- Fluorescent microplate reader capable of measuring fluorescence polarization (λex=470 (5 nm bandwidth) and detection at λem=528 (10 nm bandwidth)
Target(s)
PDE5A1
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
小鼠磷酸二酯酶5A1(PDE5A1)检测试剂盒
79602-01 96次
-20°C 小鼠磷酸二酯酶5A1(PDE5A1)检测试剂盒 79602-02 384次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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References
Ahmed W., et al., 2021 Biomedicine & Pharmacotherapy 134:111128.
Huang W., et al., 2020 Nat Commun 11:3191.
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