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来源:溶组织梭菌 酶活性的原始平衡。每批次均检测胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性。适用于上皮细胞、肝细胞、肺细胞和肾上腺原代细胞的分离。为经透析的冻干粉。
粗胶原酶制剂含有两种不同胶原酶的几种亚型,一种是氢基蛋白酶、梭状蛋白酶、胰蛋白酶样酶和氨基肽酶。这种胶原水解和蛋白水解活性的结合有效地分解细胞间基质,细胞间基质是组织解离的重要组成部分。复合物的一个组成部分是水解酶,它优先降解天然胶原蛋白中的螺旋区域,在序列Pro-Y-Gly键上,Y通常是中性氨基酸。这种裂解产生易于进一步肽酶消化的产品。粗胶原酶被金属螯合剂如半胱氨酸、EDTA或o-邻二氮菲抑制,但不被DFP抑制。它也被α2-大球蛋白抑制,α2-大球蛋白是一种大的血浆糖蛋白。Ca2+是酶活性所必需的。每种胶原酶的特定酶谱已与获得用于研究的细胞的组织(或与细胞的用途)相关联,并且由于相互关联,沃辛顿建立了几种类型的粗胶原酶:类型1、2、3和4。
1型粗胶原酶保留了胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
2型含有更高比例的蛋白酶活性,尤其是梭菌蛋白酶。
3型含有最低水平的次级蛋白酶。
4型的胰蛋白酶活性设计得特别低,以减少对膜蛋白和受体的损伤。
5型含有更高的胶原酶和酪蛋白酶值。
6型胶原酶活性高,酪蛋白酶与胶原酶的比例约为2:1。相对于1型(col G)胶原酶,该酶制剂旨在富集2型(col H)胶原酶。
7型胶原酶含有的胶原酶和酪蛋白酶活性是1型和2型胶原酶的四倍。
纯化胶原酶,产品代码:CLSPA,具有极低的次级蛋白水解活性,同时具备高胶原酶活性。
新增! 无动物来源的A型AFA、AFB、AFC以及STZ1、STZ2型胶原酶源自于在完全不含动物源性成分的培养基中培养的菌株,适用于必须避免潜在动物源性病原体引入的生物工艺应用场景。次级蛋白酶水平与1型和2型胶原酶相当。
沃辛顿还为每种类型提供0.22微米过滤的预制制剂,可直接复溶后用于细胞分离和培养流程。酶的类型与不同组织的作用效果之间相关性良好,但并非完美,部分原因是使用参数存在差异。不过,大多数研究人员认为粗制胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。沃辛顿胶原酶及污染物检测的详细说明可参见沃辛顿酶学手册</b>。此外,组织特异性参考资料和详细的分离流程可在沃辛顿组织解离指南</b>中查阅。
胶原酶测定法是对曼德尔法的改良,具体为将胶原酶与天然胶原孵育五小时,随后采用穆尔和施泰因发表于《生物化学杂志》第176卷第367页(1948年)的茚三酮比色法测定胶原的降解程度。释放的氨基酸含量以每毫克胶原酶释放的亮氨酸微摩尔数表示。
用途:粗胶原酶广泛应用于酶法原代细胞分离和组织解离流程中。大多数研究人员要么使用1型、2型、3型、4型等粗胶原酶制剂,要么使用色谱纯化胶原酶(产品编号:CLSPA);后者通常会与弹性蛋白酶、透明质酸酶等次级酶联合使用。为达到最佳效果,必须根据待解离组织的具体情况,定制蛋白水解活性的精准配比。胶原酶类型与不同组织的使用效果之间虽存在良好关联,但并非绝对,且这种关联可能部分取决于使用参数、实验目标以及不同批次间的差异。如需更多信息,请参阅胶原酶采样计划相关资料。沃辛顿公司还发布了一份组织解离指南,其中提供了这些应用所用酶类的补充信息,以及多种细胞和组织类型的具体参考资料。
关键词:- I型胶原酶
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产品组分
内容
型号
规格 储存温度
I型胶原酶 LS004194-01 100mg -20°C I型胶原酶 LS004194-02 1g -20°C I型胶原酶 LS004194-03 5g -20°C 操作手册
1 1 常温
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 -
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