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高得率Cas9 sgRNA合成纯化试剂盒是基于T7 RNA聚合酶的体外RNA转录试剂盒,可高效进行Cas9 sgRNA的制备。使用本试剂盒时,仅需按照本试剂盒说明书设计并合成 Target Sense Oligo,每次反应可获得50-150 μg的Cas9 sgRNA。获得的Cas9 sgRNA可应用于CRISPR分子诊断、基因编辑等。
Cas9 sgRNA转录引物设计
1.Cas9 sgRNA转录原理示意图
Cas9 sgRNA转录原理示意图如图1所示,试剂盒中已提供Cas9 Antisense Oligo,只需根据待测目标序列设计Target Sense Oligo即可。
2.Target Sense Oligo设计举例
2.1 选取20 bp的Target Sequence,其中方框部分为PAM序列,下划线部分为Target Sequence。

2.2 根据选取的Target Sequence设计Target Sense Oligo,则其序列应为:

其中双下划线为保护碱基,波浪线部分为T7 Promoter序列,下划线部分为Target Sequence反向互补序列,如果Target Sequence反向互补序列第一个字母是G碱基,则可以和T7 Promoter序列共用一个G碱基。下划虚线部分为SpCas9 sgRNA Scaffold部分序列。
2.3 转录得到的Cas9 sgRNA序列应为:

下划线部分为Target Sequence反向互补序列,波浪线部分为SpCas9 sgRNA Scaffold部分序列。
关键词:- 高得率Cas9 sgRNA合成纯化试剂盒
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产品组分
内容
型号
规格 储存温度
高得率Cas9 sgRNA合成纯化试剂盒
31902-01 25次 2-8°C 高得率Cas9 sgRNA合成纯化试剂盒
31902-02 50次 2-8°C 操作手册
1 1 常温
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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