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DCAF1（DDB1和CUL4相关因子1），也被称为Vpr结合蛋白（VprBP），是CRL4（cullin环连接酶4）蛋白亚家族中一种含WD40重复结构域的E3连接酶。它在E3连接酶复合物中作为底物识别单元发挥作用，例如EED（胚胎外胚层发育蛋白）-DDB1（DNA损伤结合蛋白1）-VprBP（或EDVP）复合物以及CRL4DCAF1复合物。CRL4DCAF1复合物由CUL4A（cullin-4A）、DDB1和DCAF1组成。DCAF1参与细胞内多种正常生理功能，包括细胞周期调控/进程、细胞分裂、脂质代谢以及微小RNA（miRNA）的生物发生。此外，DCAF1还具有不依赖E3连接酶的功能，可作为激酶发挥作用并使组蛋白H2A发生磷酸化。DCAF1拮抗剂可用于开发癌症治疗药物和抗病毒治疗药物。DCAF1还可用于构建双功能分子，例如蛋白水解靶向嵌合体，以诱导目标蛋白的降解。例如，使用DCAF1-BTK（布鲁顿酪氨酸激酶）PROTAC®可在对CRBN（脑蛋白）-BTK PROTAC产生耐药性的细胞中降解BTK，这使得在其他常用PROTAC出现耐药机制的情况下，DCAF1成为一种颇具潜力的替代E3连接酶。DCAF1结合剂的设计与表征是设计靶向DCAF1的分子降解剂的重要步骤。
DCAF1结合检测试剂盒是一种荧光偏振（FP）均相 96 孔检测试剂盒，专为筛选和分析抑制 DCAF1（DDB1 与 CUL4 相关因子 1）复合物与高亲和力 DCAF1 荧光探针结合的分子而设计。该试剂盒包含足够的纯化重组 DCAF1/Rbx1 (M5I)/DDB1/CUL4A 复合物、荧光探针和检测缓冲液，可进行 100 次反应。
该实验采用DCAF1荧光探针。这是一种旋转速度很快的超小分子（荧光偏振值低）。将该探针与DCAF1复合物共同孵育，会形成体积更大的复合物，其运动受到限制（荧光偏振值高）。荧光偏振值与DCAF1与荧光探针的结合程度成正比。
Assay Kit Format
Fluorescence Polarization
Species
Human
Materials Required But Not Supplied
- Adjustable micropipettor and sterile tips
- Rotating or rocker platform
- Fluorescent microplate reader capable of measuring fluorescence polarization (λex=485/20 nm and detection at λem=528/20 nm)
Target(s)
DCAF1
UniProt #
Q9Y4B6
Stability
This assay kit will perform optimally for up to 6 months from date of receipt when the materials are stored as directed.
Applications
Study and screen small molecule inhibitors that inhibit the binding of DCAF1 to the fluorescent probe for drug discovery in high throughput screening (HTS) applications.
Shipping Temperature
-80°C
Notes
Contraindications
- The final concentration of DMSO in the assay should not exceed 1%.
- Fluorescent compounds that have λex=485/20 nm and detection at λem=528/20 nm can interfere with the readouts.
Warnings
Avoid freeze/thaw cycles
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
DCAF1结合检测试剂盒
82519-01 96次
-20°C DCAF1结合检测试剂盒 82519-02 384次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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References
Li M.-Y., et al., 2020 J Clin Invest 130 (8) : 4301-4319.
Pang F., et al., 2023 Cancer Gene Ther. 30(12) :1636-1648.
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