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聚合酶是负责合成核酸的酶。θ型DNA聚合酶，也被称为DNA聚合酶θ亚基（POLQ），属于DNA聚合酶A家族。除了具备DNA聚合酶活性外，它还参与θ介导的末端连接（TMEJ）过程，这使其被归为一种特化聚合酶。TMEJ是一种易出错的DNA修复模式，除θ型DNA聚合酶外，该过程还涉及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1（PARP1）和DNA连接酶Ⅲ。θ型DNA聚合酶的抑制作用与同源重组（HR）缺陷（如BRCA（乳腺癌1/2型易感蛋白）缺陷细胞）相结合，会产生合成致死效应。这使其抑制剂成为治疗HR缺陷型癌症的潜在候选药物。它还能增强PARP抑制剂的疗效，可用于PARP抑制剂耐药的病例。θ型DNA聚合酶抑制剂的进一步研发将为癌症患者带来新的治疗选择，有望规避PARP抑制剂联合传统化疗时出现的剂量限制性毒性。
DNA聚合酶θ测定试剂盒是一种荧光测定，旨在测量用于筛选和分析应用的DNA聚合酶θ活性，利用荧光核酸染料GroovyGreen定量双链DNA（dsDNA）产物。该试剂盒采用方便的96孔格式，包含足够的重组DNA聚合酶θ酶（氨基酸1792-2590）、DR底物3、dNTP混合物和缓冲液，用于100次酶促反应。
DNA聚合酶θ利用可用的核苷酸合成与模板链互补的DNA链，形成双链DNA分子（dsDNA）。生成的双链DNA数量与聚合酶活性直接相关，可通过加入能区分双链DNA与单链DNA（ssDNA）及游离核苷酸的荧光双链DNA结合染料进行定量。由于该染料仅在与目标双链DNA结合时才会发出荧光，因此在聚合酶抑制剂存在的情况下，荧光读数较低。
Assay Kit Format
Fluorogenic
Species
Human
Materials Required But Not Supplied
Fluorescence plate reader capable of measurement at λex502/λem523 nm.
Target(s)
DNA Polymerase θ
UniProt #
O75417
Stability
This assay kit contains DNA and will perform optimally for up to 6 months from date of receipt when the materials are stored as directed.
Instructions for Use
See assay kit datasheet for detailed protocol.
Applications
- Screen molecules that inhibit polymerization activity of polymerase θ in drug discovery and high throughput screening (HTS) applications.
- Determine compound IC50.
Shipping Temperature
-80°C
Notes
Contraindications
- The final concentration of DMSO in the assay should not exceed 1%.
- Compounds that are fluorescent may interfere with the results, depending on their spectral excitation and emission properties.
- It is recommended that the compound alone is tested to determine any potential interference of the compound on the assay results.
- The presence of strong acids or bases, ionic detergents and high salt should be avoided.
Warnings
Avoid freeze/thaw cycles.
Scientific Category
DNA Replication and Repair
Regulatory Status
Research Use Only
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
DNA聚合酶θ检测试剂盒
CN82107-01 96次
-20°C DNA聚合酶θ检测试剂盒 CN82107-02 384次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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References
Berdis A., 2017, Front. Mol. Biosci. 4: https://doi.org/10.3389/fmolb.2017.00078
Zatreanu D., et al., 2021 Nature Communications 12: 3636.
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