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红细胞完全依赖糖酵解产生三磷酸腺苷（ATP），因此红细胞型丙酮酸激酶同工酶PKR（PKLR Var1）对维持细胞能量和结构完整性至关重要；丙酮酸激酶（PKR）活性降低会导致三磷酸腺苷（ATP）减少，并造成2,3-二磷酸甘油酸（2,3 DPG）等糖酵解中间产物蓄积，进而增加血红蛋白S（HbS）聚合、促进镰状化，并促成慢性溶血性贫血。丙酮酸激酶缺乏症是非球形红细胞溶血性贫血最常见的病因，其同样具有2,3-二磷酸甘油酸（2,3 DPG）升高、三磷酸腺苷（ATP）降低的代谢特征，与镰状细胞红细胞类似，这一特征会导致贫血、脱水，并增加镰状化倾向。目前已发现超过290种PKLR基因突变，其中多种与镰状细胞病（SCD）的急性疼痛相关，这些代谢紊乱为靶向丙酮酸激酶（PKR）提供了充分的理论依据。红细胞丙酮酸激酶的四聚体R型（PKR）对磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）天然亲和力较低，当其主要变构激活剂1,6-二磷酸果糖（FBP）结合后，亲和力会显著提升；1,6-二磷酸果糖（FBP）可提高红细胞对磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）的亲和力、促进四聚体化，并使PKR维持在活性形式。抑制PKR是一个具有研究价值的治疗方向，因为它可能在神经退行性疾病和炎症性疾病中发挥一定的治疗作用。
PKR激酶抑制检测试剂盒专为检测人红细胞丙酮酸激酶 PKR（亦称为 PKLR 变异体 1）的抑制活性而设计，可使用 Kinase-Glo Max 作为检测试剂，用于筛选和活性分析应用。该试剂盒采用便捷的 96 孔或 384 孔板格式，配备可进行 100 或 400 次酶促反应的足量纯化 PKR、磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）、二磷酸腺苷（ADP）、变构 PK 激活剂果糖-1,6-二磷酸（FBP）以及激酶检测缓冲液。
Assay Kit Format
Luminescent
Species
Human
Supplied As
The assay kit comes in a convenient 96 or 384-well format, with enough purified PKR, Phosphoenolpyruvate (PEP), ADP, allosteric PK activator FBP (fructose-1,6-bisphosphate), and kinase assay buffer for 100 or 400 enzyme reactions.
Materials Required But Not Supplied
- Kinase-Glo® Max (Promega #V6071)
- Microplate reader capable of reading luminescence
- Adjustable micropipettor and sterile tips
Target(s)
PKR
UniProt #
P30613
Stability
This assay kit will perform optimally for up to 6 months from date of receipt when the materials are stored as directed.
Applications
Study enzyme kinetics and screen small molecule inhibitors for drug discovery and high throughput screening (HTS) applications.
Shipping Temperature
-80°C (dry ice)
Notes
Contraindications
The final concentration of DMSO in the assay should not exceed 1%.
Warnings
Avoid freeze/thaw cycles.
Scientific Category
Neuroscience, Kinase
Regulatory Status
Research Use Only
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
PKL激酶抑制检测试剂盒
84136-01 96次
-20°C PKL激酶抑制检测试剂盒 84136-02 384次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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References
Rab MAE., et al., 2021 Blood. 137:2997-3001
Shrestha A., et al., 2021 Blood Adv. 5:2385-2390
Wang X., et al., 2022 Blood Adv. 6:3535-3540
Xu J.Z. and Vercellotti G.M., 2023 Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2023:107-113
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