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PD-L1和PD-L2与T细胞上表达的受体PD-1结合，会对免疫反应产生负向调节作用。PD-1配体PD-L1和PD-L2存在于许多癌细胞的表面，它们与受体PD-1的相互作用会抑制T细胞的活性，使癌细胞得以逃避免疫监视。该通路还参与调节自身免疫反应。因此，这些被称为免疫检查点的蛋白，是多种癌症以及多发性硬化症、关节炎、红斑狼疮和1型糖尿病的潜在治疗靶点。检查点抑制剂在多种癌症类型中展现出显著疗效，彻底改变了癌症治疗方式。PD-1抑制剂纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、西米普利单抗，以及PD-L1抑制剂阿替利珠单抗、阿维鲁单抗和度伐利尤单抗，均为美国食品药品监督管理局（FDA）批准的免疫治疗药物。
PD‑1:PD‑L1细胞水平抑制剂筛选检测是一种基于生物发光的细胞检测方法，用于筛选和分析 PD‑1:PD‑L1 相互作用的抑制剂。该检测包含两个主要组分：效应细胞以及编码 TCR 激活剂和人 PD‑L1 的表达载体。生长阻滞的 PD‑1 效应细胞（PD‑1/NFAT 报告基因 Jurkat 细胞）是在 NFAT 反应元件控制下表达萤火虫荧光素酶并表达人 PD‑1 的 Jurkat 细胞。这些冻存细胞以解冻即用形式提供，无需细胞扩增。此类细胞不可扩增，且为一次性使用。TCR 激活剂和人 PD‑L1 的表达载体为转染即用型载体，可用于转染细胞并构建过表达 PD‑L1 和工程化细胞表面 T 细胞受体（TCR）激活剂的靶细胞。若使用 96 孔板，本试剂盒包含的细胞和质粒足够完成 100 次检测。
表达组成型PD-1且带有NFAT报告基因的Jurkat T细胞（PD-1/NFAT报告基因Jurkat细胞）可作为效应细胞。共培养时，目标转染细胞系中表达的TCR激活剂会激活PD-1/NFAT报告基因Jurkat细胞上的TCR复合物，从而使NFAT荧光素酶报告基因得以表达。然而，PD-1与PD-L1的结合会抑制TCR激活并降低NFAT响应性荧光素酶活性。这种抑制作用可通过抗PD-1或抗PD-L1抗体特异性逆转。中和抗体可阻断PD-1与PD-L1的相互作用，使NFAT响应性荧光素酶报告基因重新激活。
Assay Kit Format
Luminescent
Species
Human
Materials Required But Not Supplied
- Cell line of interest, such as HEK293 cells, and corresponding culture media
- Transfection Reagent, such as Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent (Thermo Fisher #11668027)
- Opti-MEM I Reduced Serum Medium (Thermo Fisher #31985-062)
- 96-well tissue culture-treated white clear-bottom assay plate
- Luminometer
UniProt #
Q15116
Mycoplasma Testing
The cells have been screened to confirm the absence of Mycoplasma species.
Stability
Cells are shipped in dry ice and should immediately be thawed or stored in liquid nitrogen upon receipt. Do not use a -80°C freezer for long term storage. Contact technical support at support@bpsbioscience.com if the cells are not frozen in dry ice upon arrival.
Applications
- Screen for compound activity on of PD-1 or PD-L1 signaling in a cellular model.
- Characterize the biological activity of PD-1 and its interactions with ligands.
Shipping Temperature
-80°C
Notes
Warnings
Avoid freeze/thaw cycles.
Scientific Category
Immunotherapy
Regulatory Status
Research Use Only
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
PD-1:PD-L1细胞水平抑制剂筛选检测试剂盒
79377-01 96次
-20°C PD-1:PD-L1细胞水平抑制剂筛选检测试剂盒 79377-02 384次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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References
Sasca D, et al. (2019) Blood 133: 2305-2319.
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