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PD-L1和PD-L2与T细胞上表达的受体PD-1结合，会对免疫反应产生负向调节作用。PD-1配体PD-L1和PD-L2存在于许多癌细胞的表面，它们与受体PD-1的相互作用会抑制T细胞的活性，使癌细胞得以逃避免疫监视。该通路还参与自身免疫反应的调节。因此，这些被称为免疫检查点的蛋白质，是治疗多种癌症以及多发性硬化症、关节炎、红斑狼疮和1型糖尿病的潜在治疗靶点。检查点抑制剂在多种癌症类型中展现出显著疗效，彻底改变了癌症治疗方式。PD-1抑制剂纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、西米普利单抗，以及PD-L1抑制剂阿替利珠单抗、阿维鲁单抗和度伐利尤单抗，均为美国食品药品监督管理局（FDA）批准的免疫治疗药物。
细胞PD‑1:PD‑L2抑制剂筛选试剂盒是一种基于生物发光的细胞水平检测方法，用于筛选和分析 PD‑1（程序性死亡蛋白 1）:PD‑L2（程序性死亡蛋白 1 配体 2）相互作用的抑制剂。该检测包含两个主要组分：效应细胞以及编码 TCR（T 细胞受体）激活剂和人 PD‑L2 的表达载体。生长停滞的 PD‑1 效应细胞（PD‑1/NFAT 报告基因 Jurkat 细胞）是指在 NFAT 反应元件和人 PD‑1 的调控下表达萤火虫荧光素酶的 Jurkat 细胞。这些冻存细胞采用即用型形式，无需细胞培养，且不可扩增，仅供单次使用。TCR 激活剂和人 PD‑L2 表达载体为转染即用型载体，可用于转染细胞并构建过表达 PD‑L2 和工程化 TCR 激活剂的靶细胞。若使用 96 孔板，本试剂盒含有的细胞和质粒可满足 100 次检测需求。
图1：PD-1:PD-L2 细胞基抑制剂筛选实验原理示意图。 组成型表达 PD-1 且带有 NFAT 报告基因的 Jurkat T 细胞（PD-1/NFAT 报告基因 Jurkat 细胞）作为效应细胞。共培养时，PD-1/NFAT 报告基因 Jurkat 细胞上的 TCR 复合物会被目标转染细胞系中表达的 TCR 激活剂激活，从而使 NFAT 荧光素酶报告基因得以表达。然而，PD-1 与 PD-L2 的结合会抑制 TCR 激活，并降低 NFAT 响应性荧光素酶活性。这种抑制作用可通过抗 PD-1 或抗 PD-L2 抗体特异性逆转。中和抗体可阻断 PD-1:PD-L2 的相互作用，使 NFAT 响应性荧光素酶报告基因重新激活。
Assay Kit Format
Luminescent
Species
Human
Supplied As
Each kit contains sufficient reagents for 100 assays using a 96-well plate.
Materials Required But Not Supplied
- Cell line of interest, such as HEK293 cells, and corresponding culture media
- Transfection Reagent, such as Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent (Thermo Fisher #11668027)
- Opti-MEM I Reduced Serum Medium (Thermo Fisher #31985-062)
- 96-well tissue culture-treated white clear-bottom assay plate
- Luminometer
UniProt #
Q15116
Stability
Cells are shipped in dry ice and should immediately be thawed or stored in liquid nitrogen upon receipt. Do not use a -80°C freezer for long term storage. Contact technical support at support@bpsbioscience.com if the cells are not frozen in dry ice upon arrival.
Instructions for Use
See assay kit data sheet for detailed protocol.
Applications
- Screen for compound activity on PD-1 or PD-L2 signaling in a cellular model.
- Characterize the biological activity of PD-1 and its interactions with ligands.
Shipping Temperature
-80°C
Warnings
Avoid freeze/thaw cycles.
Scientific Category
Immunotherapy
Regulatory Status
Research Use Only
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
细胞PD‑1:PD‑L2抑制剂筛选试剂盒
CN79378-01 96次
-20°C 细胞PD‑1:PD‑L2抑制剂筛选试剂盒 CN79378-02 384次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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References
Sasca D, et al., 2019 Blood 133: 2305-2319.
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