iFluor 594小麦胚芽凝集素（WGA）缀合物

iFluor 594小麦胚芽凝集素（WGA）缀合物，被广泛用于标记细胞膜和纤维化瘢痕组织，用于荧光成像和分析。更多视频请关注视频号【艾维缔】。哔哩哔哩【IVDSHOW】。抖音【军哥聊表观】。

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麦胚凝集素（WGA）是一种与N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸结合的凝集素。它是目前研究最多、应用最广泛的一类凝集素。由于WGA与糖缀合物结合，其衍生物和缀合物被广泛用于标记细胞膜和纤维化瘢痕组织，用于荧光成像和分析。WGA的糖结合特异性与β-1,4-GlcNAc-连接残基的序列，即几丁质酶有关。每个单体包含两个相同的非相互作用的结合位点，它们与3或4β-1,4-GlcNAc单元互补。在所检测的单糖中，只有GlcNAc与WGA结合。甘露聚糖不结合，而GalNAc只能弱结合。WGA与含有Galβ（1--4）GlcNAcβ（1--3）重复序列（即聚乳糖胺型聚糖）的大寡糖中的内部GlcNAc残基具有高亲和力结合。N-乙酰神经氨酸只参与与WGA的低亲和力相互作用。WGA显示了复杂的糖类特异性模式，可用于复杂碳水化合物的结构分析。iFluor 594小麦胚芽凝集素（WGA）缀合物可能是最亮的WGA缀合物。它表现出了iFluor的明亮和红色荧光。iFluor 594小麦胚芽凝集素（WGA）缀合物与唾液酸和N-乙酰氨基葡萄糖残基结合，如AF594 WGA结合物那样。
样品分析方案
溶液配制
储备溶液配制
iFluor 594 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)
将 500 µL ddH₂O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的储备溶液。注意：重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存，或在 -20 °C 下长期储存。
工作溶液配制
iFluor 594-小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物工作溶液 (1X)
将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。
注意：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。
操作步骤
1.活细胞染色
1.1 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
1.2 添加 100 µL iFluor 594-WGA 工作溶液。
1.3 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。
1.4 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
1.5 使用 Cy3/TRITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。
2.固定细胞染色
2.1 在PBS中使用4％的甲醛固定细胞。
注意：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色，如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。
2.2 添加 100 µL iFluor 594-WGA 工作溶液。
2.3 在室温下用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。
2.4 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
2.5 使用 Cy3/TRITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。
图 1. 使用 iFluor 594-小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物以 5 µg/mL的浓度在活细胞（Hela细胞）染色 30 分钟，然后用 Hoechst 33342（型号：17535）染色。最后使用带 Cy3/TRITC和DAPI滤波片组的荧光显微镜成像。
关键词:
- iFluor 594小麦胚芽凝集素（WGA）缀合物
产品组分
内容
型号
规格
储存温度
iFluor 594小麦胚芽凝集素（WGA）缀合物
25550
1mg
-20°C
操作手册
1 1
常温
操作手册
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文件内容
资源说明
25550-iFluor 594小麦胚芽凝集素（WGA）缀合物操作手册
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内容	型号	规格	储存温度
iFluor 594小麦胚芽凝集素（WGA）缀合物	25550	1mg	-20°C
操作手册	1	1	常温

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