补充精油和绿藻对肉鸡生产性能、免疫力及新城疫病毒感染的影响
发布时间:
2026-06-15 21:47
补充精油和绿藻对肉鸡生产性能、免疫力及新城疫病毒感染的影响
亚斯明·H·阿斯福尔 ,哈立德·M·A·马赫兰 ,穆斯塔法·A·巴斯塔米 艾哈迈德·S·哈穆达 ,穆罕默德·R·穆萨 ,马哈茂德·A·易卜拉欣 以及阿德尔·K·易卜拉欣*
埃及开罗大学兽医学院临床病理学系,吉萨,12211
埃及开罗大学兽医学院家禽疾病系,吉萨,12211
埃及开罗大学兽医学院病理学系,吉萨,12211
埃及MA制药工业公司(MAPCO)首席执行官
摘要
绿藻(螺旋藻)和一些精油(如柠檬烯、樟脑和桉叶油)的功效被用于评估精油和钝顶螺旋藻的抗病毒和免疫刺激作用。随着家禽业在遗传学、营养和健康方面的进步满足了全球对动物蛋白的需求,然而快速生长导致家禽免疫系统和肠道健康下降。欧洲对抗生素生长促进剂(AGPs)的禁令,以及消费者对更安全肉类需求的增加,促使人们寻找天然替代品,如益生元和益生菌。精油已显示出改善家禽免疫力、肠道健康和饲料效率的潜力。绿藻(螺旋藻)和精油因其对采食量、消化和免疫力的积极影响,越来越多地被研究作为AGP替代品。120只混合性别的肉鸡被分为六组,每组20只:(G1)对照组(未处理);(G2)新城疫病毒攻毒组;(G3)螺旋藻处理组且未进行新城疫病毒攻毒;(G4)螺旋藻处理组且进行新城疫病毒攻毒;(G5)精油(EO)处理组且未进行新城疫病毒攻毒;(G6)精油处理组且进行新城疫病毒攻毒。每天记录临床症状和死亡率,每周记录活体重。计算生产性能参数,包括活体重增加、采食量和饲料转化率。每周采集血样,实验结束时,对所有鸡实施安乐死,并采集器官进行组织病理学检查。我们记录到,精油作为家禽饲料添加剂对新城疫病毒具有免疫刺激作用,因为它们能增强体液免疫和细胞免疫,且对内脏器官无病理影响。
关键词:精油,螺旋藻,新城疫病毒,临床病理学,血清学
引言
群体免疫力对家禽生产至关重要[1]。饲料添加剂可增强免疫力、饲料转化率和生长[2]。欧盟禁止使用抗生素作为生长促进剂(欧盟委员会,2001年),原因是微生物对某些抗生素的耐药性增加以及肉类产品中的残留可能对人类构成风险。抗生素生长促进剂(AGPs)导致了各种致命灾难,如抗生素耐药性、肠道微生物群破坏以及对消费者的潜在风险,这些对全球公共卫生构成了威胁。因此,科学家们被促使去寻找像益生元和益生菌这样的环保替代品[3]。精油(EOs)是通过蒸馏从植物中提取的天然产物[2,4],已显示出改善家禽免疫力、肠道健康和饲料效率的潜力[5]。精油的例子包括柠檬、肉桂、薰衣草、桉树、百里香和甜橙油[4]。精油具有抗菌[6]、抗氧化[7]和抗病毒特性[8]。它们的协同组合可抑制肠道微生物生长并提高营养物质消化率[9],从而增强家禽免疫力[10,11]。精油已被证明对肉鸡血液参数有积极影响,如红细胞计数、血细胞比容、血红蛋白、总蛋白、白蛋白、球蛋白以及白蛋白:球蛋白比率[12],同时降低血清胆固醇和甘油三酯[9]。使用精油混合物还观察到血清ALT(肝脏损伤指标)降低[13],表明对肝脏健康有积极影响。
钝顶螺旋藻是一种富含蛋白质、氨基酸、脂肪酸、矿物质和维生素的蓝绿微藻[3,14],具有抗氧化[15]、免疫调节、抗炎、抗病毒和抗菌活性[16]。补充螺旋藻可提高营养物质利用率、体重增加(BWG)、抗病能力、胴体品质和饲料转化率(FCR)[17]。它还能降低血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,显示出保肝作用,并降低血糖、甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白水平[18]。
新城疫(ND)由一种有包膜的单链RNA病毒引起[8],是一种急性致命的家禽疾病。在埃及,新城疫病毒呈地方流行性,即使实施了疫苗接种计划,由于高死亡率仍造成重大经济损失[19]。本研究旨在评估精油和钝顶螺旋藻对肉鸡新城疫感染的抗病毒和免疫刺激作用,评估生产性能、血液学和生化参数以及组织病理学结构的变化。
材料与方法
本研究在埃及吉萨开罗大学兽医学院进行,符合国家动物福利法规,并得到机构动物护理与使用委员会(IACUC)的批准,批准号为CU II F221。
实验鸡
120只1日龄的混合性别的肉鸡被随机分为六组(n = 20):(1)对照组(未处理);(2)新城疫病毒攻毒组;(3)螺旋藻处理组;(4)螺旋藻处理且新城疫病毒攻毒组;(5)精油(EO)处理组;(6)精油处理且新城疫病毒攻毒组。
饮水补充
从第2天至第42天,将干燥的钝顶螺旋藻 和一种商业精油产品(“超级免疫产品”,1 ,按照制造商说明供应)添加到饮水中给药。
饲料
按照美国国家研究委员会(NRC)指南(Bonos等人,2016年),提供商业颗粒肉鸡饲料(Elwattania),自由采食:育雏期(1 - 14天)、生长期(15 - 28天)和育肥期(29 - 42天)。
疫苗接种程序
所有组在第5天接种新城疫和传染性支气管炎(IB;Hitchner B1株)疫苗,第14天接种传染性法氏囊病(IBD)疫苗,第19天接种新城疫(Lasota株)疫苗。实验感染:在第35天,第2、4和6组通过滴眼 和滴鼻 途径,用10^6.3 EID50 /100 /只的新城疫病毒进行攻毒,以磷酸盐缓冲盐水(PBS)作为载体,阴性对照组用相同体积和途径的磷酸盐缓冲盐水进行攻毒[20]。实验持续到感染后第42天(PI)。攻毒的新城疫病毒分离株基因分型为强毒速发型新城疫病毒(VVNDV)基因型VIId(NDV - B7 - RLQP - CH,Eg - 12;GenBank登录号KM288609)。
临床症状和生产性能参数
每天记录临床症状和死亡率以计算死亡率。每周记录活体重。计算以下生产性能参数:(a)活体重增加:终末体重减去初始体重。(b)饲料消耗:每组消耗的总饲料量除以鸡的数量。(c)饲料转化率(FCR):总饲料消耗量除以体重增加量。
采样
禁食12小时后,每周(第7、14、21、28、35和42天)采集样本。将血液样本采集到含有乙二胺四乙酸二钾的试管中(用于血液学检测)和平板试管中(用于分离血清进行生化和血清学分析)。将泄殖腔和口咽拭子采集到含有抗生素的PBS(pH 7.0 - 7.4)中用于分子检测。在实验结束时,对所有鸡实施安乐死,并采集器官(气管、肺、肾、肝、法氏囊和腺胃)用于组织病理学检查,保存在10%中性缓冲福尔马林中。
临床病理检查:
血液学:
使用Neubauer血细胞计数板手动测定红细胞(RBC)和白细胞总数(TLC)。通过微量血细胞比容离心法(15,000转/分钟,5分钟)测量血细胞比容(PCV)。采用比色法(氰化高铁血红蛋白法)测定血红蛋白(Hb)浓度。计算RBC指数和白细胞分类计数(DLC)[21]。
生物化学:
使用商用试剂盒(埃及Spectrum诊断公司)通过比色法评估血清生化指标(肝功能和肾功能标志物:总蛋白、白蛋白、AST、ALT、GGT、肌酐和尿酸)。计算球蛋白和白蛋白/球蛋白(A/G)比值[22]
血清学:
通过血凝抑制(HI)试验(Allan & Gough,1974)测量新城疫病毒(NDV)抗体反应。正如评估NDV疫苗和免疫反应的研究所表明的,标准程序在当代研究中仍然适用,[23]。
分子检测:
根据制造商说明,使用总RNA纯化试剂盒(德国耶拿生物科学有限公司)提取所选样品的病毒基因组RNA,使用商用试剂盒Quantitect Probe rRT-PCR试剂盒(加利福尼亚州瓦伦西亚的Qiagen公司)进行逆转录实时聚合酶链反应(rRT-PCR)。使用的引物为NDV-F(F + 4829)5’-GGT GAG TCT ATC CGGARG ATA CAA G-3’,NDV-R(F - 4939)5’- TCA TTG GTT GCR GCA ATG CTC T-3’和探针 - (F + 4894)
5’-FAM-AAG CGT TTC TGT CTC CTT CCT CCA-BHQ-3’ [18]。在Strata gene 3005P MX pro实时PCR系统(美国Strata gene公司)中进行实时rRT-PCR。使用
Qiagen一步酶混合物按照制造商说明进行RT-PCR扩增,使用针对完整F基因的引物组[24]。
组织病理学:
每周收集气管、肺、肾、肝、法氏囊和腺胃样本,进行处理,用苏木精和伊红(H&E)染色,并进行显微镜检查(Fischer等人,2008)。
统计分析:
使用单向方差分析或Kruskal-Wallis检验(用于非正态分布数据)分析血液学、生物化学和血清学数据,随后进行Benjamini-Hochberg校正的事后分析以进行多重比较。使用Fisher精确检验分析NDV PCR阳性率。使用RStudio(Posit团队,2023)和R(R核心团队,2023)进行统计分析。数据以平均值 标准差表示,组间 的显著差异用不同字母表示。
结果:
临床检查:
不同实验组的鸟类在攻毒前外观正常。然而,如表(1)所示,攻毒后的实验组鸟类出现了不同程度的抑郁、头部肿胀、结膜炎、啰音、打喷嚏和鼻腔分泌物,这些症状在攻毒后第二天(PC)开始出现。
血液学结果:
红细胞图:
不同实验组红细胞图结果的统计分析如表(2)所示,结果显示在实验第1周各组之间无显著变化。同时,在实验第6周,组(5和6)的红细胞平均数值显著增加。然而,与阴性对照组相比,组(2、3和4)的红细胞平均数值显著降低。同时,组(3、4和6)的血红蛋白(Hb)和平均血红蛋白浓度(MCHC)平均数值显著增加。然而,组5的Hb和MCHC平均数值显著降低。
白细胞图:
白细胞图结果的统计分析如表(3)所示,结果显示在实验第1周和第5周,不同实验组的白细胞总数(TLC)平均值无显著变化。然而,在实验第6周(用新城疫病毒攻毒后),组(4和6)出现显著白细胞增多。然而,在实验第5周(用新城疫病毒攻毒前),组(1)出现嗜异性粒细胞增多和嗜酸性粒细胞增多,与仅出现嗜异性粒细胞增多的组2不同。即便如此,组(3)的淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞绝对计数平均值显著降低。组(4)的单核细胞绝对计数平均值显著降低。组(5)的嗜异性粒细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞平均值显著降低,而组(6)与阴性对照组相比,单核细胞和嗜酸性粒细胞平均值显著降低。
在实验第6周,补充螺旋藻或精油并感染新城疫病毒的鸡组(组4和6)与阴性对照组相比,出现显著白细胞增多和淋巴细胞增多,组4出现显著单核细胞增多。同时,阳性攻毒对照组(组2)与阴性对照组(组1)相比,TLC平均值无显著变化。
生物化学结果:
生物化学结果的统计分析如表(4)所示,结果显示在实验第1周,与阴性对照组相比,以下参数(谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、总蛋白、白蛋白、球蛋白和白球比(A/G比))在各组之间无显著变化。
在实验第5周,补充螺旋藻的鸡组(组3和4)与阴性对照组相比,A/G比平均值显著降低。同时,补充精油的鸡组(组5和6)的 比平均值显著增加。
在第6周,补充螺旋藻的鸡组(组3和4)的GGT平均值显著降低,总蛋白平均值显著增加,其中只有组(3)的球蛋白平均值与阴性对照组(组1)相比显著增加。
生物化学结果的统计分析如表(5)所示,结果显示在实验第1周和第5周,与阴性对照组(组1)相比,以下参数(肌酐和尿酸)在各组之间无显著变化。
在实验第6周,补充螺旋藻的鸡组(组4)的尿酸平均值显著增加。
血清学检测:
血清学检测结果如表(6)所示,结果显示在接受感染的组中,尤其是补充精油的对照组(组2)和(组6),新城疫病毒抗体效价显著降低。
病毒排毒:
组织病理学检查:
在检测新城疫病毒(NDV)时,表达接受螺旋藻(G4组)和精油(G6组)的鸡群中病毒感染和排毒情况的口咽(发病机制)和泄殖腔(排毒)CT值。
通过实时PCR在口咽感染后检测新城疫病毒(NDV)。对照组的CT显示为阳性。而在接受螺旋藻和精油的组中,如表格(7)所示,G4组和G6组的口咽样本感染减少,泄殖腔样本排毒减少。
心脏:
对G1、G3和G5组的检查显示心肌细胞的组织学结构正常,心肌细胞呈长圆柱形、分支状,细胞核位于中央且呈细长形。G2组显示血管周围有大量水肿,心肌细胞分散,有单核炎性细胞浸润。G4组和G6组的心肌结构明显正常,未检测到任何异常(图1)。
肾脏
对除G2组外的实验组进行光镜检查,发现皮质区域的组织学结构正常,由紧密排列的肾单位和髓质锥体(髓质束)组成,髓质锥体包含集合小管、哺乳动物肾单位的袢状小管、输尿管分支以及间质结缔组织中的毛细血管网。相反,G2组显示多灶性间质性肾炎,其特征是单核炎性细胞浸润并伴有肾小管坏死(图2)。
肺:
对G1组的光镜检查显示正常的呼吸小叶,由围绕副支气管的空气和毛细血管组成。同样,G3组和G5组的肺组织组织学结构正常。关于G2组,间质血管严重充血,支气管腔内可见脱落的上皮细胞、炎性细胞浸润和坏死组织碎片。在几只受影响的鸡中检测到增殖反应,其特征是增殖的衬里上皮使副支气管的心房和漏斗间隙闭塞,在严重受影响的个体中平滑肌肥大。G4组在一些三级支气管腔内可见不同程度的粘液渗出,伴有平滑肌衬里轻度肥大。关于G6组,可见明显正常的肺小叶,无明显的组织病理学改变(图3)。
肝脏:
对G1、G3和G5组的检查显示肝实质的组织学结构正常,肝板为两层细胞厚。关于G2组的组织病理学检查,在肝组织中经常观察到广泛的肝细胞坏死以及多灶性单核炎性细胞聚集和门脉性肝炎。G4组在一些检查切片中显示门脉区有炎性细胞浸润。G6组有明显改善,门三联管区炎性细胞浸润数量有限,周围肝板明显正常(图4)。
讨论:
埃及的家禽已成为动物蛋白的重要来源。这样一个庞大的产业受到多种病原体的挑战。新城疫(ND)是一种地方性疾病,仍通过在家禽群中持续传播,即使在接种疫苗的群体中,也会影响家禽养殖的效益。欧盟(欧盟委员会,2001年)完全禁止使用抗生素饲料添加剂作为生长促进剂,因为这会导致微生物对多种抗生素产生耐药性,抑制有益的肠道微生物群,并且肉类产品中的抗生素残留可能对消费者有风险。因此,正在测试益生元或益生菌等饲料添加剂来解决与从饲料中停用抗生素相关的问题。[3],[25]
包括酸化剂、益生菌、益生元、植物源生物活性物质、饲料酶、免疫刺激剂和抗氧化剂在内地替代饲料添加剂被用于维持低死亡率和良好的转化率,同时保护环境和消费者健康,这些替代品被称为天然生长促进剂(NGP)或非抗生素生长促进剂[26]。相比之下,芳香植物提取物及其纯化成分,特别是精油,是一类新型饲料添加剂,关于它们的作用方式和应用方面的知识仍然相当基础[27]。
本研究结果显示,在(G6)组中,饮用水中添加0.5 mL/L的EOs混合物可使红细胞、血红蛋白浓度和平均红细胞血红蛋白浓度显著增加,在(G5)组中仅使红细胞显著增加,这与[28]一致。然而,在(G5)组中,血红蛋白和平均红细胞血红蛋白浓度的平均值显著降低,[29]也报道了类似结果,这可能是由于新城疫(VND)中常见的血管内溶血和失血,通常表现为腺胃出血和胃肠道溃疡,由于攻毒和采样之间的间隔时间不足,这种降低并未反映在红细胞和红细胞压积上。
在本研究中,(G4)组和(G3)组饲喂钝顶螺旋藻导致红细胞显著减少,这与[30]一致,血红蛋白和平均红细胞血红蛋白浓度显著增加,这可能是由于新城疫病毒(NDV)感染引起的溶血性贫血,与[31]一致。
仅用水处理的(G1和2)组的白细胞图谱显示显著的嗜异性粒细胞增多和嗜酸性粒细胞增多(仅在G1组),这可能是由寄生虫感染引起的。嗜异性粒细胞是粒细胞白细胞之一,作为抵御病原体的第一道防线发挥作用。嗜异性粒细胞增多通常与急性和慢性炎症反应相关。嗜酸性粒细胞增多与寄生虫感染相关,在鸟类中很少报道,这与[32]的结论一致。
与红细胞特征相似,在实验第5周,(G3和4)组补充钝顶螺旋藻的鸟类淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞显著减少,这与[30]一致,与[33]不一致,这种减少可能是由于钝顶螺旋藻中的毒素长期暴露导致肝脏损伤,如[34]所述。
(G4)组在攻毒后(第6周)以预防性方式用螺旋藻处理的白细胞图谱显示白细胞增多、淋巴细胞增多和单核细胞增多(仅在G3组出现单核细胞增多),因为补充螺旋藻可能刺激骨髓干细胞的活性,从而增强机体的全身特别是免疫细胞防御,这与[35]一致。
在第6周(G6)用EOs处理的组的白细胞图谱显示显著的白细胞增多和淋巴细胞增多,这与[12]一致,这可能是由于精油作为免疫刺激剂,如[36]所示。
在(G3)组中,补充螺旋藻对新城疫攻毒肉鸡血清生化参数的影响显示尿酸显著增加,这与[37]一致,与[35]不一致,[35]讨论尿酸水平显著降低是由于螺旋藻恢复肾小球滤过的保护作用,如[38]所述。因此,尿酸浓度的增加可能归因于新城疫感染,如[39]所讨论的类似结果。
而(G3和4)组总蛋白和球蛋白显著增加,这被认为与强大的免疫反应相关,并表明更高的抵抗力,[35]也报道了类似结果。
用EOs处理的(G5和G6)组的生化图谱显示γ-谷氨酰转移酶(GGT)显著降低,GGT是肝胆疾病的主要标志物,揭示肝内和肝外胆石症[40],这一结果与[12]不一致。
血清学检测显示,攻毒的(G6)组新城疫抗体滴度(血凝抑制试验)显著降低。
本研究结果显示,在 时饮用水中添加EOs混合物直至攻毒年龄(第28天),新城疫血凝抑制抗体滴度(log2)没有显著增加,这与[41]和[42]的文章一致。因此,血清学和分子结果表明精油具有抗病毒作用,这与[43]一致。
用螺旋藻处理并感染新城疫的肉鸡肝脏组织的组织病理学研究显示明显的门静脉肝炎,这与[35]不一致。而用EOs处理并感染新城疫的肉鸡显示轻度门静脉炎症,周围肝细胞明显正常,这些变化与新城疫感染有关[44]。
G2组的心脏组织病理学显示,血管周围有大量水肿,心肌细胞分散,伴有单核炎性细胞浸润,根据[44],这与新城疫病毒感染有关。然而,在G4和G6组中检测到正常的心肌结构,没有任何可检测到的异常,这表明螺旋藻和精油都具有抗病毒作用。
G2组的肺组织病理学显示,间质血管严重充血,支气管腔内可见脱落的上皮细胞、炎性细胞浸润和坏死组织碎片。在几只受影响的鸟类中检测到增殖反应,其特征是增殖的衬里上皮细胞阻塞了副支气管的心房和漏斗间隙,在严重受影响的个体中平滑肌肥大,如[44]中所述,这是由于新城疫病毒感染所致。G4组在一些三级支气管腔内显示出不同程度的粘液渗出,伴有平滑肌衬里轻度肥大,这与[45]不一致。关于G6组,可见明显正常的肺小叶,没有任何明显的组织病理学改变。
G2组的肾脏组织病理学显示多灶性间质性肾炎,其特征是单核炎性细胞浸润,伴有肾小管坏死,这是新城疫病毒感染的结果,与[44]一致。
结论:
我们可以得出结论,作为家禽饲料添加剂,精油比螺旋藻更可取,并且对病毒性疾病尤其是新城疫病毒具有免疫刺激作用,因为它们增强了体液免疫和细胞免疫,并且对内脏器官没有病理影响。
致谢:不适用
资金声明
本研究得到了开罗大学研究生研究基金的支持。
利益冲突声明
作者声明不存在利益冲突。
伦理批准
本研究遵循埃及吉萨开罗大学兽医学院的伦理准则,符合国家动物福利法规,并得到了机构动物护理和使用委员会(IACUC)的批准,批准号为CU II F221。
表1. 用新城疫病毒攻击的G2、4和6组的总体临床症状。
| 小时数(挑战后) | G2 | G4 | G6 |
| %(受影响鸟类/总数) | |||
| 24小时 | 10 (2/20) | 30 (2/20) | 20 (2/20) |
| 48小时 | 20 (2/20) | 35 (2/20) | 30 (2/20) |
| 72小时 | 15 (2/20) | 30 (2/20) | 15 (2/20) |
| 96小时 | 15 (2/20) | 30(2/20) | 15 (2/20) |
| 120小时 | 25 (2/20) | 15(2/20) | 15 (2/20) |
| 144小时 | 0 (2/20) | 10 (2/20) | 10 (2/20) |
| 168小时 | 10 (2/20) | 5 (2/20) | 5 (2/20) |
表2. 在不同实验期间,在饮水中添加精油和螺旋藻并感染新城疫病毒的肉鸡的红细胞图。
| W | 第三 | 第四 | 第五 | |||||||||||||||
| G | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 |
| 红细胞 | 1.52±0 .21a | 1.37±0 .20ª | 1.56±0 .12a | 1.39±0 .21a | 1.47±0 .36ª | 1.23±0 .21a | 2.25±0 .17ab | 1.87±0 .20b | 1.96±0 .26b | 1.77±0 .21b | 2.61±0 .39a | 2.61±0 .398 | 2.03±0. | . 098 | 2.20±0 .27ª | 1.84±0 .088 | 1.69±0 .71a | 2.04±0 .028 |
| 血红蛋白 (克/分升) | 6.82±0 .92 | 7.34±1 .238 | 6.41±1 .28a | 5.88±0 .498 | 6.57±1 .24a | 7.11±1 .238 | 7.49±1 .08 | 7.36±1 .26ª | 7.33±1 .34a | 6.81±0 .55a | 9.26±0 .895a | 9.26±0 .895a | 6.44±0. | 6.60±0. 62 | 7.42±0 .47ab | 8.19±0 .25a | 5.62±0 .35° | 7.52±0 .96 |
| 红细胞压积 (%) | 26.67± 1.53a | 27.33± 2.08a | 26.00± 3.61a | 25.67± 3.21a | 26.67± 1.15a | 27.33± 1.15a | 27.33± 0.58 | 27.33± 1.53a | 26.67± 0.58a | 29.33± 1.15a | 29.33± 1.15a | 27.67± | 28.33± 1.15a | 27.67± 0.58a | 26.67± 3.068 | 25.33± 0.58 | ||
| 平均红细胞体积 | 176.5± | 202.2± | 167.7± | 189.3± | 188.9± | 225.7± | 121.9± | 144.9± | 140.4± | 152.3± | 114.3± | 114.3± | 137.4± | 155.5± | 126.7± | 145.3± | 165.2± | 137.2± |
| (飞升) | 16.6a | 32.2a | 26.6a | 50.5 % | 46.1a | 31.8a | 11.6a | 10.5a | 10.7a | 16.3a | 21a | 21a | 12.6a | 12.2a | 14a | 14.7a | 53.4a | 6.6a |
| 平均红细胞血红蛋白浓度 | 25.53± | 26.75± | 24.58± | 23.02± | 24.56± | 25.93± | 27.38± | 27.18± | 26.72± | 25.52± | 31.52± | 31.52± | 23.29± | 23.32± | 26.8±1 | 30.92± | 22.17± | 26.81± |
| (克/分升) | 2.098 | 2.58a | 2.25a | 1.018 | 3.53a | 3.538 | 3.358 | 3.658 | 3.468 | 1.6a | 2.18bc | .19b | 2.54a | 0.91° | ||||
* 数值代表均值 ,同一列中带有不同上标(a和b)的均值在P值 水平上存在显著差异
表3. 在不同实验时间段内,饮水中添加精油和螺旋藻并感染新城疫病毒的肉鸡的血常规
| W | 第三 | 第四 | 第五 | |||||||||||||||
| G | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 |
| 薄层色谱法 | 25.85 | 25.22 | 24.78 | 24.54 | 25.36 | 25.33 | 29.69± | 28.89± | 23.94± | 25.23± | 25.16± | 25.83± | 29.91 | 30.28± | 32.07± | 38.35 | 29.96± | 39.87± |
| (每微升10³个) | 1.068 | 2.668 | 2.69b | 0.54b | 3.56b | 1.738 | ||||||||||||
| 异嗜性粒细胞 | 3±0.5 | 2.6±0. | 2.66± | 2.3±0. | . | 7.2±1. | 7.46±1. | 5.20±1 | 6.14±1 | 3.57±0. | 9.38± | 10.42± | 9.73±0 | 9.52± | 10.66± | 9.28±1 | ||
| (每微升10³个) | 0.306a | 0.115a | 347a | 347a | 137a | .013ab | .412ab | 986b | 018b | 1.468 | .70ª | 1.088 | .088 | |||||
| 淋巴细胞 | 20.92 | 20.89 | 20.04 | 19.91 | 21.05 | 21.05 | 19.97± | 19.27± | 17.1±1 | 17.39± | 20.51± | 20.51± | 19.82 | 18.87± | 18.95± | 25.93 | 16.6±2 | 27.55± |
| 个 (每微升10³个) | ±1.67ª | ±2.18ª | 1.56 | 1.33abc | .4c | 1.25bc | 1.33a | 1.44bc | 1.01bc | .65° | 0.74a | |||||||
| 单核细胞( | 1.38± | 1.36± | 1.58± | 1.41± | 1.40± | 1.43± | 1.73±0 | 1.52±0. | 1.14±0 | 1.14±0 | 0.55±0. | 0.55±0. | 0.46± | 0.70±0 | 2.75±0 | 2.44±0 | 2.54±0 | |
| (每微升10³个) | 0.468 | 0.17a | 0.278 | .208a | 302a | .216b | .209b | 062c | 062c | 0.053c | .175c | .175a | 0.092b | .316ab | .183ab | |||
| 嗜酸性粒细胞 | 0.54± | 0.56± | 0.55± | 0.58± | 0.60± | 0.54± | 0.79±0 | 0.64±0. | 0.49±0 | 0.55±0 | 0.52±0. | 0.53±0. | 0.24± | 0.28±0 | 0.63±0 | 0.58± | 0.25±0 | 0.5±0. |
| (每微升10³个) | 0.12a | 0.118 | 0.075a | 0.078 | .15a | .0866 | .089ab | 0208b | 0208b | 0.14a | .13a | .15a | 0.13a | .18a | 15a | |||
* 数值代表均值 ,同一列中带有不同上标(a和b)的均值在P值 水平上存在显著差异
表4. 在不同实验阶段,饮水中添加精油和螺旋藻并感染新城疫病毒的肉鸡的生化结果。
| W | 第三 | 第四 | 第五 | |||||||||||||||
| G | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 |
| 谷丙转氨酶 (单位/升) | 7.86±1 .58a | 8.13±1. | 6.77±1 .29a | 5.76± 1.29a | 8.33±0 .40 a | 8.66± | 9±1° | 10.66± 0.57 a | 9.66±0 .578 | 9.66±0 .578 | 5±0ab | 3.66±0. 57b | 6±1° | 6.66± 0.57 a | 6.33±1 .52a | |||
| 谷草转氨酶 (单位/升) | 77.33± 1.15a | 77.33± 0.58 | 76±2.6 5a | 74±4° | 74.67± 3.798 | 74.67± 3.79a | 73.33± 0.58 | 75.33± 1.15a | 73±2.6 5a | 74±2.6 5a | 228.3± 20.2a | 241.7± 14.4a | 208.3± 14.4a | 164.3± 11.4a | 225±2 5a | 233.3± 15.3a | ||
| γ-谷氨酰转肽酶 | 29.3±3 | 30.03± | 21.77± | 20±3. | 20.23± | 20.23± | 20±3. | 15±6.2 | 19±2. | 19.33± | 17.67± | 17.67± | 307.7± | 283.3± | 154.3± | 165.3± | 190±1 | 115.7± |
| (单位/升) | .8a | 16.43a | 2.55a | 2.55a | 第46条 | 658 | 7.098 | 5.13a | 5.13a | 29.3a | 25.2a | 44.7bc | 40.2bc | 0b | 9c | |||
| 总计 | 2.333± | 2.267± | 2.633± | 2.4±0. | 2.33±0 | 2.63±0 | 2.23± | 2.36±0 | 2.63± | 2.67±0 | 2.33±0 | 2.43±0 | 1.93±0 | 2.23±0 | 4.37±1. | 4.3±0.8 | 2.13± | 3±0.26 |
| 蛋白质 (克/分升) | 0.378 | 0.25a | 0.308 | 26a | .30a | .308 | .578 | 0.208 | .25a | .408 | .408 | .58b | .11b | 008 | 1a | 0.25b | b | |
| 白蛋白 | 1.73±0 | 1.3±0.4 | 1.6±0. | 1.4±0. | 1.56±0 | 1.56±0 | 1.16± | 1.16±0 | 0.93± | 0.96±0 | 1.2±0. | . | 0.66±0 | 0.83±0 | 1.1±0.4 | 1.23±0. | 1.1±0. | 0.9±0. |
| (克/分升) | .15a | a | 26a | 1a | .31a | .35a | .25a | 0.05a | .11a | 3a | .23a | .15a | 3a | 408 | 17a | |||
| 球蛋白 | 0.6±0. | 0.83±0. | 1.03±0 | 1±0.3 | 1.06±0 | 1.07±0 | 1.07± | 1.2±0. | 1.7±0. | 1.7±0. | 1.23±0 | 1.3±0. | 1.26±0 | 1.4±0. | 3.26±0. | 3.06±0. | 1.03± | 2.1±0. |
| s(克/分升) | 368 | 15a | .25a | 4a | .05ª | .07a | 368 | 23a | 268 | .568 | 58a | .55度 | 17c | 68ab | 0.41度 | 45bc | ||
| A/G | 1.65±0 | 1.23±0. | 1.5±0. | 1.57± | 1.34±0 | 1.48±0 | 1.03±0 | 0.54± | 0.59±0 | 1.67±0 | 1.47±0 | 0.41±0 | 0.60±0 | 0.43±0. | 0.43±0. | 0.4±0. | 0.45±0 | |
| .14a | 25a | 0.41 a | .22a | 0.23b | .20b | 0.07c | .12度 | .05a | .08 | .098 | .16a | 068 | 13a | 1a | .18a | |||
* 数值表示平均值±标准误,同一列中带有不同上标(a和b)的平均值在P值 时存在显著差异。
表5. 在不同实验期间,给饮水中添加精油和螺旋藻并感染新城疫病毒的肉鸡的生化结果。
| W | 第三 | 第四 | 第五 | |||||||||||||||
| G | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 |
| 肌酐(毫克/分升) | 0.74±0. 21178 | 0.76±0. 1155a | 0.70±0. 17798 | 0.79±0 .12a | 0.73±0 .188 | 0.72±0 .15a | 0.26±0 | 0.28±0 .098 | 0.27±0 | 0.36±0 .19a | 0.29±0 .038 | 0.28±0 .038 | 0.24±0. | 0.25±0 .038 | 0.29±0 .11a | 0.34±0. 06a | 0.23±0 a | 0.23±0 .028 |
| 尿酸(毫克/分升) | 6.3±0.2 6ª | 5.96±0. 76ª | 7.06±0. 902a | 5.63±1 .65 | 8.67±1 .678 | 8.07±1 .628 | 3.23±1 | 1.96±0 .668 | 044a | 5.4±2. 381a | 3.56±0 .8a | 3.57±0 .82 | 2.633± | 2.73±0 .35b | 8.76±1 .76 | 4.56±0. 8146 | 5.23±2 .25b | 5.36±0 |
* 数值代表平均值±标准误,同一列中带有不同上标(a和b)的平均值在P值<0.05时有显著差异。
表6. 在不同实验期间,在饮水中添加精油和螺旋藻并感染新城疫病毒的肉鸡的血清学检测。
| 周 | G1 | G2 | G3 | G4 | G5 | G6 |
| 第三 | 1.0±0.02° | |||||
| 第四 | ||||||
| 第五(个人电脑) |
* 数值代表平均值 ,同一列中带有不同上标(a和b)的平均值在P值 时存在显著差异
表7. 表达在饮水中添加精油和螺旋藻的肉鸡经新城疫病毒攻毒后的病毒感染和排毒情况的CT值,并与对照组进行比较。
| 组 | 口咽拭子CT | 泄殖腔拭子CT | ||
| 感染 | 接触 | 感染 | 接触 | |
| G2 | 19.93±1.61° | 19.48±0.64° | 24.24±2.02 | |
| G4 | 25.49±2.58 | 26.64±3.47 | ||
| G6 | 25.58±2.25 | 28.25±0.65 | 29.1±2.66 | |
* 数值表示平均值±标准误,同一列中带有不同上标(a和b)的平均值在P值 时有显著差异

图1. 不同实验组心脏染色切片的显微照片(苏木精-伊红染色)。(a) G1组显示心肌细胞的正常组织结构。(b) G2组显示血管周围大量水肿(红色箭头)。(c) G2组显示心肌细胞分散并伴有炎症细胞浸润(黑色箭头)。(d)和(e)分别代表G3组和G4组明显正常的心肌。(f)和(g)分别代表G5组和G6组明显正常的心肌。

图2:不同实验组肾脏的显微照片(苏木精-伊红染色)。(a) G1组显示肾皮质区域的正常组织结构。(b) G2组显示局灶性间质性肾炎(箭头),周围肾小管坏死。(c) G3组显示肾小球和皮质肾小管的正常组织结构。(d) G4组显示肾皮质明显正常。(e) G5组显示肾皮质正常。(f) G6组显示肾小管和间质组织明显正常。

图3. 不同实验组肺脏的显微照片(苏木精-伊红染色)。(a) G1组显示由空气和毛细血管组成的呼吸小叶的正常组织结构。(b) G2组显示副支气管壁的增殖反应,平滑肌肥大(箭头),内衬上皮细胞增多,注意管腔被脱落的上皮细胞和坏死组织碎片阻塞。(c) G3组显示正常肺组织。(d) G4组显示支气管腔内有大量粘液渗出物(星号),平滑肌轻度肥大。(e)和(f)分别代表G5组和G6组明显正常的呼吸小叶。

图4. 不同实验组肝脏染色切片的显微照片(苏木精-伊红染色)。(a) G1组显示肝细胞排列成肝板的正常组织结构。(b) G2组显示肝实质弥漫性坏死性改变并伴有门脉性肝炎(箭头)。(c) G3组显示肝实质的正常组织结构。(d) G4组显示明显的门脉性肝炎(箭头)。(e) G5组显示正常组织结构。(f) G6组显示轻度门脉炎症,周围肝细胞明显正常。
参考文献
1. Hafez, H. M and Attia, Y. A., Challenges to the Poultry Industry: Current Perspectives and Strategic Future After the COVID-19 Outbreak’, Front Vet Sci., 7, 558359(2020), doi: 10.3389/FVETS.2020.00516/PDF.
2. Jang, I. S., Ko, Y. H., Kang, S. Y. and Lee, C. Y., ’Effect of a commercial essential oil on growth performance, digestive enzyme activity and intestinal microflora population in broiler chickens’, Anim Feed Sci Technol., 134, (3-4), 304-315(2007), doi: 10.1016/J.ANIFEEDSCI.2006.06.009.
3. Ragab, M. S. and Fathi, M., ’Effect of Dietary Supplementation of Algae Meal (Spirulina Platensis) As Growth Promoter on Performance of Broiler Chickens’. Egyptian Poultry Science, 38(2), 375- 389(2018), [Online]. Available: http://www.epsj.journals.ekb.eg/
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肉鸡,螺旋藻,精油,抗生素
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